O que são Bactérias Gram-negativas
As bactérias Gram-negativas referem-se a um grupo de células bacterianas que ficam coradas de vemelho devido a um corante de contraste no teste de coloração de Gram e são caracterizadas pelo pequeno teor de peptidoglicano na sua parede celular e por possuírem uma membrana externa.
Parede celular das bactérias Gram-negativas
Na parede celular de bactérias Gram-negativas (ver Figura 1), a mureína (o mesmo que peptidoglicano) tem apenas cerca de 2 nm de espessura e contribui até 10% da massa seca da parede da célula.
A membrana externa é o elemento estrutural saliente. Contém numerosas proteínas (50% em massa), bem como o lipopolissacarídeo (LPS) clinicamente crítico.
O LPS é um complexo molecular, também conhecido como endotoxina e compreende o lípido A, o polissacárido central e a cadeia de polissacárido O-específico
A membrana externa inclui porinas que são proteínas que formam poros na membrana e permitem a passagem de substâncias hidrofílicas de baixo peso molecular para o espaço periplásmico.
As bactérias Gram-negativas incluem também o espaço periplásmico que é o espaço entre a membrana citoplasmática interna e a membrana externa externa. Pode constituir até 40% do volume celular total em espécies Gram-negativas.
O espaço contém uma rede solta de cadeias de peptidoglicano, bem como um gel contendo enzimas hidrolíticas e degradativas. Outras enzimas no gel estão envolvidas em várias vias bioquímicas, incluindo síntese de peptidoglicanos, transporte de eletrões e alteração de substâncias tóxicas para a célula (metabolismo dos xenobióticos). Em algumas espécies, o gel também contém beta-lactamase, uma enzima responsável pela degradação da penicilina. Fato de importância clínica quando se considera a resistência a antibióticos.
Bactérias Gram-negativas e patogenecidade
Muitas espécies de bactérias Gram-negativas são patogénicas, o que significa que elas podem provocar doenças no organismo hospedeiro.
Esta capacidade patogénica está habitualmente associada com certos componentes das paredes de células Gram-negativas, em particular a camada de lipopolissacarídeo (também conhecida como LPS ou endotoxina). Nos seres humanos, o LPS desencadeia uma resposta imune inata caracterizada pela produção de citocinas e ativação do sistema imunológico. A inflamação é um resultado comum da produção de citocinas que também pode lesar o hospedeiro.
O teste de coloração de Gram
As bactérias Gram-negativas são as bactérias que não retêm o corante de cristal violeta no protocolo de coloração de Gram.
Num teste de coloração de Gram, é adicionado um corante de contraste (comummente safranina ou fucsina) após o cristal violeta, corando todas as bactérias Gram-negativas com uma cor vermelha ou rosa. Já as bactérias Gram-positivas retêm o corante de cristal violeta quando lavadas numa solução descolorante.
O teste é útil porque reflete dois tipos distintos de bactérias com base nas diferenças estruturais de suas paredes celulares.
Comparação com as bactérias Gram-positivas
A parede celular de bactérias Gram-positivas não possui a membrana externa e a sua camada de mureína é mais espessa e contém ácidos teicoicos.
A próxima tabela mostra resumidamente as diferenças mais relevantes entre bactérias Gram-negativas e Gram-positivas.
Gram-positiva |
Gram-negativa |
|
|
Púrpura (devido ao corante cristal violeta) |
Vermelha (devido ao corante de fundo – safranina ou fucsina) |
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15 a 80 nm |
2 nm |
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Ausente |
Uma que recobre a camada de peptidoglicano |
|
Ausente |
Na membrana externa |
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2 anéis |
4 anéis |
|
Geralmente presente |
Ausente |
|
Ausente |
Presente |
|
ausente |
Presente |
References:
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Kapoor, K. (2010). Illustrated Dictionary of Microbiology. NewDelhi: Oxford.
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Kayser, F.H., Bienz, K.A., Eckert, J., Zinkernagel, R.M. (2004). Medical Microbiology. Stuttgart: thieme.
-
Raver, P. H., & Johnson, G. B. (2002). Biology (6th ed.). Boston: Mcgraw-Hill.
-
Solomon, E.P., Berg, L.R., Martin, D.W. (2008). Biology (8th ed.). Belmont: Thomson Brooks/Cole.