Concepto de Vectores No Virales
Los vectores no virales son utilizados para la entrega de material genético a células en la terapia genética. Al contrario de los vectores virales, éstos utilizan virus para la entrega de ADN pues, a pesar de la eliminación del material genético viral, aún pueden presentar alguna inmunogenecidad. Son varios los vectores no virales que pueden ser utilizados en la terapia genética.
Uno de los métodos más utilizados para este propósito es la inyección de ADN desnudo (naked DNA). Este es el método más simple que existe y consiste en la inyección del gen de interés en el paciente. A pesar de algunos test clínicos haber demostrado que el ADN desnudo puede ser utilizado en la terapia genética, éste tiene algunos problemas, principalmente los niveles de expresión génica que son bajos cuando este método es utilizado. Otra hipótesis es la utilización de la electroporación. Este método consiste en la aplicación de pulsos cortos de alto voltaje de modo a permeabilizar la membrana celular a través de la formación de poros temporales en ésta. Esto permite que el ADN de interés entre en la célula a través de los poros, volviendo este método más eficiente que el anterior. El gran problema de la electroporación es que la aplicación de altos voltajes lleva a que haya una tasa de muerte celular elevada. También el Gen Gun puede ser utilizado para tomar la transducción de ADN más eficaz. Para eso el ADN es cubierto de partículas de oro y es cargado en un aparato que va a disparar el ADN para que éste entre en las células.
Otros métodos que pueden ser utilizados como vectores no virales son los métodos químicos. Dos ejemplos de estos son los lipoplejos y los poliplejos. Éstos son utilizados para proteger el ADN de daños causados durante la transfección. En el caso de los lipoplejos, el ADN es cubierto por lípidos que van a encapsular el ADN. Hay tres tipos de lipoplejos que pueden ser formados: los aniónicos, los neutros y los catiónicos. Debido a algunos problemas detectados en la utilización de lípidos aniónicos y neutros, los lípidos catiónicos comenzaron a ser los más estudiados. Éstos van a encapsular el ADN plasmídico formando liposomas que después van a interactuar con la membrana celular. Esto lleva a la endocitosis de los lipoplejos, ocurriendo después la liberación del ADN en el citoplasma. Sin embargo, los poliplejos son un complejo de polímeros que encapsulan el ADN en su estructura siendo utilizados mayoritariamente polímeros catiónicos. El proceso de transporte de ADN es semejante al que ocurre en los lipoplejos. La gran diferencia es que los poliplejos no consiguen liberar el ADN en el citoplasma. Para ese propósito es necesario incorporar ciertos agentes, los endossome-lytic agents, que permitirán que ocurra la liberación del ADN.
Además de los métodos descritos hay otros métodos que son estructurados para que puedan ser utilizados como vectores no virales para terapia génica. Tal como todos los métodos utilizados para la terapia génica, éstos continúan también siendo estudiados para que en un futuro próximo puedan ser aprobados para uso terapéutico.
